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特殊染色
基本信息
| 中文名 | 特殊染色 |
| 拼音 | tè shū rǎn sè |
| 應用 | 器官硬化性疾病的觀(guān)察 |
| 價(jià)值 | 很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù) |
| 包括 | 網(wǎng)狀纖維染色、彈力纖維染色 |
應用價(jià)值
現代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細胞及分子生物學(xué)技術(shù)應用日益廣泛，但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴，對于一部分病人以及某一些基層醫院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無(wú)需復雜的實(shí)驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢，在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應用價(jià)值。
比如，當細胞中出現色素，是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等，用組織化學(xué)技術(shù)區別起來(lái)很簡(jiǎn)單，所以組織化學(xué)技術(shù)，雖然已有幾十年到幾百年的歷史，仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)。
常用特染
膠原纖維的染色
凡是間葉組織細胞都可產(chǎn)生網(wǎng)織纖維，也可產(chǎn)生膠原纖維，纖維母細胞是產(chǎn)生膠原纖維的主要細胞。膠原纖維是結締組織中的主要纖維，是結締組織中起支持作用的重要部分，具有一定的韌性和堅固性，能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯開(kāi)1/4平行排列交聯(lián)成膠原原纖維，膠原原纖維再聚合成較寬的結構。按膠原的化學(xué)成分可分為15種，間質(zhì)中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成，新鮮時(shí)呈白色，故又稱(chēng)為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色，與周?chē)g質(zhì)區分不是很清楚。染色后，便可明顯區別開(kāi)來(lái)，易于觀(guān)察病變時(shí)膠原纖維的變化。
應用
膠原纖維染色
網(wǎng)狀纖維染色
網(wǎng)狀纖維是非常細而短的纖維，大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀，故有網(wǎng)狀纖維之稱(chēng)。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少，它多分布在結締組織與其它組織交界處，如在上皮組織與結締組織交界處的基膜內，毛細血管周?chē)约霸煅鞴伲?/span>內分泌腺的腺細胞團索和外分泌腺的腺末房周?chē)忍幘胸S富的網(wǎng)狀纖維。
網(wǎng)狀纖維的變化，反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過(guò)程，對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細緊密、疏松或斷裂，都是病理檢驗的重要指標，尤其是在臨床病理診斷中，可根據其存在和分布來(lái)鑒別癌與肉瘤。而在HE染色標本上，網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色，在臨床病理診斷上占著(zhù)相當重要的位置。
應用：
（1）癌與肉瘤的鑒別：在網(wǎng)狀纖維染色下可清楚顯示出肉瘤每一個(gè)細胞周?chē)芯W(wǎng)狀纖維圍繞，或似為團狀或巢狀的瘤組織，但團巢內仍有破碎的網(wǎng)狀纖維，癌顯示為明顯巢或索狀，巢內無(wú)網(wǎng)狀纖維。
（2）骨基質(zhì)與濃縮的分泌物、血漿或水腫液的鑒別：骨基質(zhì)內有網(wǎng)狀纖維，而后者無(wú)。
（3）炎癥細胞與癌細胞的鑒別：在支氣管活檢中有時(shí)擠壓較重，一些深染的細胞擠壓成團，難以判斷是受擠壓的炎癥細胞。這種病例染網(wǎng)狀纖維有利于鑒別，炎癥細胞不成巢，小細胞癌可有巢狀或索狀結構。
（4）壞死與死后自溶的鑒別：在胰腺是生前壞死還是死后自溶有時(shí)很難鑒別，染網(wǎng)狀纖維，前者網(wǎng)狀纖維支架破壞較嚴重，結構塌陷，而后者雖然死后自溶?chē)乐?，但網(wǎng)狀纖維支架結構?？杀４?。
（5）血管性腫瘤的鑒別：有時(shí)血管內皮細胞瘤與血管周?chē)毎龀Ｒ幦旧^難鑒別，網(wǎng)狀纖維染色，可顯示清楚的血管結構，看清腫瘤細胞與血管關(guān)系有利于鑒別。內皮細胞性腫瘤，腫瘤位于血管壁的網(wǎng)狀支架內，而外周細胞則圍繞著(zhù)血管壁或與之呈放射狀排列。
a．慢性活動(dòng)性肝炎壞死灶有時(shí)較難辨認，染網(wǎng)狀纖維顯示局部有網(wǎng)狀支架的破壞與崩解，結合HE切片較易判斷小灶狀壞死。
b．慢性活動(dòng)性肝炎輕度纖維化，在網(wǎng)狀纖維染色下較易判斷。
c．慢性淤血性肝硬變有時(shí)較難判斷，網(wǎng)狀纖維較易觀(guān)察中央靜脈及小葉下靜脈通道上的網(wǎng)狀纖維增生。增生較明顯，有反包圍現象，形成假小葉結構，就可診斷淤血性肝硬變。
（8）有助于癌浸潤的診斷，有些上皮性腫瘤是否早期突破基底膜形成浸潤，HE染色難以確診，而網(wǎng)狀纖維染色可較清楚顯示基底膜，較易確定基底膜有無(wú)早期浸潤破壞現象。
（9）腦內原發(fā)瘤與轉移瘤的鑒別：腦內絕大多數腫瘤網(wǎng)狀纖維很少，只有血管周?chē)猩倭烤W(wǎng)狀纖維，而轉移癌及肉瘤都有明顯的網(wǎng)狀纖維，故有利于鑒別。
（11）淋巴結病變的判斷：
網(wǎng)狀纖維染色
彈力纖維染色
彈力纖維是結締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維，在創(chuàng )傷修復中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大，容易伸展，在結締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成，新鮮時(shí)呈黃色又稱(chēng)黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng)，折光性強，含量多時(shí)在HE染片上呈折光性強的粉紅色，量少的不顯色。故量多時(shí)與膠原纖維不易區別，量少則不能觀(guān)察。彈力纖維染色主要用于觀(guān)察彈力纖維有無(wú)增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。
應用：
（1）動(dòng)靜脈的辨認：在血管病變時(shí)是動(dòng)脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認時(shí)，彈力纖維染色有助于辨認。有彈力板者為動(dòng)脈，有彈力纖維構成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強，故彈力性纖維構成血管輪廓不易損壞。
（2）彈力纖維瘤的診斷：彈力纖維染色可見(jiàn)瘤樣病變內有大量彈力纖維增生，非真性腫瘤。
（3）心血管先天性彈力組織增生，這組疾病有先天性?xún)饶ぱ准肮跔顒?dòng)脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。
（5）一些與彈力纖維變化有關(guān)的皮膚疾病的診斷與鑒別診斷：這組疾病有皮膚松弛癥，萎縮性硬化性苔蘚等，其診斷與鑒別診斷常依賴(lài)于彈力纖維染色，以觀(guān)察彈力纖維變化。
糖類(lèi)染色
糖類(lèi)從組織化學(xué)技術(shù)角度來(lái)分，可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些腫瘤的病變中分布和量都有一定改變，故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。
（1）肝及心肌糖原沉著(zhù)癥的診斷：糖原染色顯示在肝或心肌細胞內有大量糖原存在即可確診。
（3）高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別：前者為陽(yáng)性、后者為陰性，做此染色較易鑒別。
（4）骨內骨外尤文氏肉瘤的診斷：此瘤 80%細胞內有較多糖原，糖原染色為陽(yáng)性，所以糖原染色為陽(yáng)性（大多數細胞）可以協(xié)助診斷。
（5）腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤：前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。
粘液染色
應用：
（1）水腫與粘液變性：皮膚真皮水腫與粘液變性有時(shí)較難以從組織學(xué)上區別，染粘液有助于鑒別。
（2）硬皮病與硬腫病的鑒別：后者膠原纖維增生，纖維之間粘液陽(yáng)性物質(zhì)增多，有助于這兩者之間的鑒別。
色素染色
（含鐵血黃素及黑色素）
含鐵血黃素是由漏出于血管外的紅細胞，被巨噬細胞吞噬后，分解血紅蛋白產(chǎn)生的顆粒，HE染色為棕黃色，故稱(chēng)為含鐵血黃素。因有時(shí)與福爾馬林沉渣及黑色素等難相區別，故做含鐵血黃素染色。
應用：
主要用于同其它色素鑒別，若為陽(yáng)性，顯示陳舊性出血。黑色素常見(jiàn)于皮膚色素細胞，惡性黑色素瘤?？僧a(chǎn)生黑色素。組織內大量存在時(shí)呈棕黑色，易于鑒別。但少量存在時(shí)便難與其它色素相鑒別，須作黑色素染色。
應用：
（1）黑色素瘤的診斷與鑒別診斷：腫瘤細胞內色素是否為黑色素，染黑色素有助于確定黑色素性質(zhì)及腫瘤的定性診斷。
（2）血色病與黑便?。赫嫫扔猩爻林?zhù)，黑色素陰性而含鐵血黃素陽(yáng)性者可能為前者。
神經(jīng)原纖維染色
神經(jīng)原纖維呈細線(xiàn)狀，存在于神經(jīng)細胞體及樹(shù)突中，它們形成一個(gè)稠密的網(wǎng)狀，軸突中的原纖維也互相交織在一起，且伸延至軸突全長(cháng)。在HE染色中呈粉紅色，難與膠原纖維相區別，故須作神經(jīng)纖維染色。
應用：
（1）有利于觀(guān)察神經(jīng)原纖維的損傷。
（2）神經(jīng)系統腫瘤的診斷與鑒別診斷：如神經(jīng)母細胞瘤與未分化癌的區別等。
病原微生物染色
真菌和霉菌：真菌引起的病變雖然多種多樣，但都不具有特異性，且真菌在HE染色中均顯藍色，故須作真菌染色。
應用：
細菌：細菌在HE染色上不能分類(lèi)，故須作細菌染色。
應用：
（1）一些疑為細菌感染性炎癥，可用細菌染色進(jìn)一步確定病原診斷。如傷寒肉芽腫性炎或葡萄球菌性炎等化膿性炎癥的診斷中細菌染色有很重要的診斷價(jià)值。
注意事項
染色前：
②撈片時(shí)，最好一張玻片撈一個(gè)組織，組織最好位于玻片的中間，美觀(guān)的同時(shí)也利于脫蠟（有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候，達不到脫蠟的目的）。
③石蠟切片脫蠟到水時(shí)，一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底（脫蠟時(shí)間不能太少）以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面，在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸，最終導致染色效果不佳，甚至染不上顏色。
④在染色過(guò)程中最好不要在玻片上貼標簽紙，以避免脫蠟時(shí)把標簽紙也浸沒(méi)，致使標簽紙上的膠黏到玻片上，造成染色不佳。
⑤在染色前，用有色鉛筆在組織周?chē)鷦澮粋€(gè)圈，這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì )使染液溢出。
染色時(shí)：
①染色時(shí)必須嚴格按照染色操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色。
②在染色過(guò)程中，前一個(gè)染液浸染完成后，在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。
③ 每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。
④在滴加染液時(shí)，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費試劑。
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