SARS-CoV-2(新型冠狀病毒)
病原學(xué)檢測
1.實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測新型冠狀病毒核酸陽(yáng)性;
2.病毒基因測序,與已知的新型冠狀病毒高度同源;
血清學(xué)檢測
1.新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽(yáng)性;
2.新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉為陽(yáng)性或恢復期IgG抗體滴度較急性期呈4倍及以上升高。 (由于疫情隨時(shí)可能變化,具體請參考國家衛健委,中國國家疾控中心相關(guān)診治方案)
MERS-CoV
中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)
病原學(xué)檢查主要包括病毒分離、病毒核酸檢測。病毒分離為實(shí)驗室檢測的“金標準”。病毒核酸檢測可以用于早期診斷。檢測時(shí)應及時(shí)留取多種標本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或氣管抽取物、痰或肺組織,以及血液和糞便)進(jìn)行檢測,其中以下呼吸道標本陽(yáng)性檢出率更高。 1.病毒核酸檢測(PCR)。以RT-PCR(最好采用real-time RT-PCR)法檢測呼吸道標本中的MERS-CoV核酸。
2.病毒分離培養??蓮暮粑罉吮局蟹蛛x出MERS-CoV,但一般在細胞中分離培養較為困難。
SARS-CoV
嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)
1.SARS-CoV RNA檢測:SARS-CoV RNA陽(yáng)性判斷標準為PCR檢測結果符合下列三項之一者可判斷為陽(yáng)性。 (1)至少需要兩個(gè)不同部位的臨床標本檢測陽(yáng)性(例如鼻咽分泌物和糞便)。
(2)收集至少間隔2天的同一種臨床標本送檢檢測陽(yáng)性(例如2份或多份鼻咽分泌物)。
(3)在每一個(gè)特定檢測中對原臨床標本使用兩種不同的方法,或從原標本新提取RNA開(kāi)始重復PCR檢測陽(yáng)性。
PCR檢測結果的確認:①使用原始標本重復PCR試驗;②在第二個(gè)實(shí)驗室檢測同一份標本。
2.SARS-CoV特異性抗原N蛋白檢測:定性檢測血清或血漿標本中SARS-CoV核衣殼(N)抗原,用于SARS-CoV感染的早期輔助診斷。
3.SARS-CoV特異性抗體檢測:特異性抗體檢測診斷SARS標準為符合以下兩者之一即可診斷為SARS。
(1)平行檢測急性期血清抗體和恢復期血清抗體發(fā)現抗體陽(yáng)轉。 (2)平行檢測急性期血清抗體和恢復期血清抗體發(fā)現抗體滴度升高≥4倍。 FeCV
貓冠狀病毒FeCV
貓傳染性腹膜炎(FIP)是目前導致貓死亡的重要原因之一。貓冠狀病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度傳染性病毒而且偏好發(fā)生在數量及種類(lèi)繁多而且養在一起的家養貓。FeCV是廣泛的貓冠狀病毒Feline Coronavirus(FCoV)中的一種。
樣品
需1ul血清或血漿,只能檢測貓的樣品。樣品可在2~8℃保存7天,如果需要更長(cháng)的保存,樣品可保存在-20℃。嚴重紅細胞溶解或脂溶血會(huì )產(chǎn)生干擾的顏色,所以盡可能去得到更好質(zhì)量的樣品。 準備洗滌液
讓洗滌濃縮液達到室溫,輕輕地倒置混勻。用蒸餾水或去離子水稀釋洗滌濃縮液(1份洗滌濃縮液加至9份水中),稀釋后的洗滌液可保存于2~7℃。 結果
a.檢測的有效性必須是:陽(yáng)性質(zhì)控孔里的液體呈清晰的藍色,而陰性質(zhì)控孔里的液體保持清澈。
c.如果樣品孔里無(wú)顏色變化表明沒(méi)有感染FIP疾病。
以下內容物包含在試劑盒里:
包被好的酶標板8×12孔
陽(yáng)性質(zhì)控血清1.5ml
陰性質(zhì)控血清7.0ml
蛋白A HRP標記物5.0ml
濃縮洗滌液100.0ml
注意事項
*試劑盒使用前恢復至室溫(21~25℃)
*不同樣品使用不同的加樣器頭
*不要把試劑盒直接暴露在陽(yáng)光下
*不要使用過(guò)期的試劑或不同試劑盒里試劑一齊混雜使用
*嚴格按照步驟操作,不適當的洗滌或試劑污染將產(chǎn)生非專(zhuān)一性的顏色
*僅限獸醫使用
保存和穩定性
將試劑盒和稀釋的洗滌液保存于2~7℃,不要冷凍。只要在適當保存條件下,試劑在有效期內是穩定的。